SBF – 250 – Sociedade Brasileira de Fitopatologia XXXVI Congresso Brasileiro de Fitopatologia Manejo Integrado de Doenças de Plantas

SEQÜÊNCIA DE NUCLEOTÍDEOS DE CAPA PROTÉICA DE ISOLADO BRASILEIRO DO Potato virus Yntn.
SAWAZAKI, H. E.; SOUZA-DIAS, J. A. C. & MÓDOLO, D. G.
PVYntn: Coat protein sequencing of a Brazilian isolate.

Potato virus Y (PVY) isolado de tubérculos de batata (Solanum tuberosum cv. Monalisa) que apresentavam anéis necróticos superficiais sugestivos da infecção pela estirpe PVYNTN (Souza-Dias et al., . Summa Phytopat 25(1):36.1999; Souza-Dias, Summa Phytopat 26(1): 160-168. 2000), foi caracterizado molecularmente neste trabalho. Após confirmada a identidade de PVY via DAS-ELISA (IgG policlonal) e necrose das nervuras em plantas de fumo (Nicotiana tabacum cv. Turkish ou TNN) inoculadas mecânicamente, RT-PCR com primers específicos de 3 literaturas permitiram a identificação inicial do PVYNTN . As sequências alinhadas dos aminoácidos foram agrupadas pelo Clustal X e visualizadas pelo Njplot. O cDNA e RT-PCR do RNA total extraído dos tubérculos sintomáticos (kit GeneAmp da Applied Biosystems) originaram o amplicon do capsídeo com os primers sense (5`CCACCAYATGGSAAATGACACAATYGATGCA3`) e antisense (5`GAGCTCATGTTYTTSACTCCAAGYAG3`), o qual foi clonado em pMOSBlue (Amersham) e sequenciado no ABI PRISM 377. Através de BLAST , o isolado estudado confirmou ser a estirpe PVYNTN pela similaridade de 97% dos 798 nucleotídeos observados da capa protéica, ao acesso AJ390291 e proximidade de ligação ao agrupamento de outros dois isolados de PVYNTN . Essa constatação a nível molecular vem ao encontro das suspeitas patológicas mencionadas, apesar de alerta preventivo feito anteriormente (Souza-Dias, Informe Agropecuário, Belo Horizonte, 18 (184):54-63. 1996).